用western blot做磷酸化蛋白的测定需要注意哪些问题

用western blot做磷酸化蛋白的测定需要注意哪些问题 磷酸化蛋白指的是什么?怎么知道自己做的蛋白是磷酸化蛋白?我做的是western blotJAK 和stat是不是磷酸化因子？ 细胞蛋白如何提取?做western blot的 细胞蛋白如何提取 Western Blot（WB）实验最后显色过程中总是没有条带?最近做Western Blot蛋白印迹实验 ,大家推荐下做Western Blot外包的公司,北京的最好,Western Blot的价格 检测磷酸化我想用western blot 检测蛋白的磷酸化,但是找不到具体的操作protocol,希望有前辈能够给张瞄瞄,一般western的protocol我有，但觉得检测磷酸化可能会有些不一样的操作，希望能够有针对 如何提取小鼠脂肪组织的蛋白和做western blot 做western blot时,蛋白降解后转膜以后是什么样 急需脑啡肽的分子量,做western blot用 做western blot时为什么转膜后膜上没有蛋白?用marker标记 western blot转膜时 电流330mA,转膜1小时后 膜上没有marker的条带请问这是为什么呢? western blot如何应用于目的蛋白的组织定位 蛋白western blot实验需要注意的有些什么 请问western blot用什么设备做? 请问做Western blot非要测样品的浓度吗 一般用什么方法测 蛋白加样缓冲液的作用是什么 有人做过500kd的蛋白western blot的实验吗?可以分享实验条件吗? 做western blot时上样量过高会导致类似于PCR的平台期而掩盖目的蛋白的趋势么?为什么? 血浆、血清、冻存血细胞总蛋白如何提取?-80度冻存的血浆、血清、血细胞,我想做WESTERN blot 选择western blot抗体想做JNK、P38、erk1/2这几种抗体,请问怎么选择相应的磷酸化抗体,我不知道磷酸化位点,文献都说的不清楚啊?请做过的前辈帮帮我 , western blot的具体步骤?