western blot内参抗体actin为什么出了好几条带开始做western blot,一切试剂、仪器都是临时买的或凑齐的,做了几次actin检验.第一次出了一条很弱的带；第二次动物血清干扰,都出了2条带,主带分子量

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/06 01:11:41
western blot内参抗体actin为什么出了好几条带开始做western blot,一切试剂、仪器都是临时买的或凑齐的,做了几次actin检验.第一次出了一条很弱的带；第二次动物血清干扰,都出了2条带,主带分子量

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western blot内参抗体actin为什么出了好几条带
开始做western blot,一切试剂、仪器都是临时买的或凑齐的,做了几次actin检验.第一次出了一条很弱的带；第二次动物血清干扰,都出了2条带,主带分子量很大；第三次没出；第四次则出了大小不一的几条带.问题出自哪呢?

western blot内参抗体actin为什么出了好几条带开始做western blot,一切试剂、仪器都是临时买的或凑齐的,做了几次actin检验.第一次出了一条很弱的带；第二次动物血清干扰,都出了2条带,主带分子量
首先要确定你的样品没有降解,基本上看带型可以确定,条带要干净,没有拖尾,其次是你的一抗,这个需要跟别个同学做的对比,这两个问题排除后主要就是你的抗体稀释度了,浓度过高,显影底物过强都会出现杂带,而杂带跟你每次操作包括洗脱的时间 孵育的时间的不同,都可能出现在不同的位置

条件没有优化好，比如抗体浓度太高，显影时间太长，然后产生的非特异条带。

关于western blot 内参是什么 血清western blot怎样选择内参? Western Blot为什么必须要用内参 Western Blot为什么必须要用内参 Western Blot为什么必须要用内参 Western Blot为什么必须要用内参 Western Blot为什么必须要用内参 Western Blot为什么必须要用内参 Western Blot为什么必须要用内参 Western Blot为什么必须要用内参 western blot等生物学试验中的内参是什么意思? western blot的内参总是做不好...老是条带不一致 western blot抗体洗脱液的配方? β-Actin抗体是Western Blot很好的内参指数,是啥意思?β-Actin在整个Western Blot的作用是什么?而且能不能详细介绍下Western Blot的抗体了?本人刚学这个,不懂,望高人指导,不胜感激. 关于western blot抗体的稀释western blot抗体用什么稀释? 做western blot时内参抗体如何选择?比如针对目的蛋白,我的一抗是小鼠来源的,二抗是山羊抗小鼠的；针对内参β-actin的抗体如何选择呢?我可以直接选择小鼠来源的HRP抗体吗?选择小鼠来源的一抗 做western blot 的时候怎样选择抗体浓度? western blot 抗体孵育盒哪里有卖